To perform the procedure, a total o

To perform the procedure, a total of 0.5 to 1.0 × 1010 bac- teria growing in 100–200 ml of minimal defined medium are fil- tered slowly (1–2 min) under vacuum onto the membrane filter at the appropriate temperature in a warm room or any convenient table-top incubator (Figure 4A). The entire filter holder is then inverted (Figure 4B), culture medium is poured into the top of the inverted holder (about 300 ml), and tubing from a reservoir of medium is connected to the stem of the funnel with a stop- per. To produce a sealed system, the tubing should be attached to a narrow glass or rigid plastic tube installed in a hole bored through a stopper of appropriate size, as shown. It is helpful to have most of the stem of the funnel cut off, as indicated in the figure, to ease pouring of the medium and connection of the stop- per. A peristaltic pump can be used to regulate the rate of medium flow into the apparatus after inversion. It should be set at about 15 ml/min for a few minutes to flush off weakly attached cells and then reduced to 2 ml/min thereafter. Alternatively, if you wish to perform tests before obtaining a pump, a reservoir bottle witha bottom outlet can be placed above the apparatus with a hose clamp acting as the flow regulator. In either case, once medium flow begins, the underside of the membrane will become con- vex with drops coming from the center as seen in Figure 4B. The smooth, convex shape of the membrane is VERY important because it enables the medium to flow uniformly over the surface of the attached cells, and to form drops that fall exclusively from a single point at the center of the membrane.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทำขั้นตอน รวมบัค 0.5 1.0 × 1010-ขึ้น 100 – 200 ml ของกลางน้อยที่สุดกำหนด teria มีไฟล์ tered ช้า (1-2 นาที) ภายใต้สุญญากาศบนตัวกรองเมมเบรนที่เหมาะสมอุณหภูมิในห้องที่อบอุ่นหรือใด ๆ สะดวกโต๊ะบ่มเพาะวิสาหกิจ (รูปที่ 4A) ใส่ตัวกรองทั้งหมดจะกลับแล้ว (รูปที่ 4B), วัฒนธรรมกลางเป็น poured ลงบนยึดกลับ (ประมาณ 300 มล.), และเชื่อมต่อกับก้านกรวยด้วยการหยุด-ต่อท่อจากอ่างเก็บน้ำของกลาง ผลิตระบบปิดผนึก ท่อที่ควรแนบกับกระจกแคบหรือท่อพลาสติกแข็งที่ติดตั้งในหลุมเบื่อผ่านจุกขนาดที่เหมาะสม แสดง ประโยชน์ที่มีทั้งก้านกรวยที่ตัดออก ตามที่ระบุในภาพ เทกลางและเชื่อมต่อการหยุด-ต่อให้ได้ ปั๊ม peristaltic สามารถใช้ควบคุมอัตราการไหลกลางลงในเครื่องหลังจากกลับ มันควรจะตั้งที่ประมาณ 15 ml/min ในไม่กี่นาทีเพื่อล้างเศษเซลล์สูญแนบแล้ว ลด 2 ml/min หลังจากนั้น หรือ ถ้าคุณต้องการดำเนินการทดสอบก่อนรับปั๊ม ขวดอ่างเก็บน้ำ มีร้านด้านล่างสามารถวางด้านบนเครื่อง มีท่อแคลมป์ที่ทำหน้าที่เป็นการควบคุมกระแส ในกรณีอย่างใดอย่างหนึ่ง เมื่อเริ่มไหลปานกลาง underside ของเมมเบรนที่จะติด-กวนกับหยดมาจากศูนย์เท่าที่เห็นในรูปที่ 4B ราบรื่น นูนรูปร่างของเมมเบรนมีมาก เพราะมันช่วยให้กลางสม่ำเสมอเมื่อเทียบเคียงไหลผ่านพื้นผิวของเซลล์ที่แนบ และแบบหยดน้ำที่ตกจากจุดเดียวโดยเฉพาะของเมมเบรนสำคัญ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อดำเนินการตามขั้นตอนรวมเป็น 0.5-1.0 × 1010 bac- เทอเรียที่เพิ่มขึ้นใน 100-200 มล. ของกลางที่กำหนดไว้ที่น้อยที่สุดเป็น fil- อกไว้อย่างช้า ๆ (1-2 นาที) ภายใต้สุญญากาศกรองเมมเบรนบนที่อุณหภูมิที่เหมาะสมในที่อบอุ่น ห้องหรือศูนย์บ่มเพาะสะดวกใด ๆ บนโต๊ะ (รูปที่ 4A) ผู้ถือกรองทั้งหมดจะกลับแล้ว (รูปที่ 4B) กลางวัฒนธรรมเทลงในด้านบนของที่วางคว่ำ (ประมาณ 300 มล.) และท่อจากอ่างเก็บน้ำขนาดกลางมีการเชื่อมต่อกับต้นกำเนิดของช่องทางที่มี stop- ต่อ เพื่อผลิตเป็นระบบปิดผนึกท่อควรจะยึดติดอยู่กับกระจกแคบหรือท่อพลาสติกแข็งที่ติดตั้งในหลุมเบื่อผ่านจุกขนาดที่เหมาะสมตามที่แสดง มันจะมีประโยชน์ที่จะมีมากที่สุดของต้นกำเนิดของช่องทางที่ตัดออกไปตามที่ระบุไว้ในรูปเพื่อความสะดวกในการเทของกลางและการเชื่อมต่อของ stop- ต่อ ปั๊ม peristaltic สามารถนำมาใช้ในการควบคุมอัตราการไหลของกลางลงไปในอุปกรณ์หลังจากที่ผกผัน มันควรจะตั้งไว้ที่ประมาณ 15 มล. / นาทีไม่กี่นาทีในการล้างเซลล์อ่อนที่แนบมาและลดลงไปแล้ว 2 มล. / นาทีหลังจากนั้น หรือถ้าคุณต้องการที่จะดำเนินการทดสอบก่อนที่จะได้รับการปั๊มขวดอ่างเก็บน้ำ witha ร้านด้านล่างสามารถอยู่เหนือกับอุปกรณ์ยึดท่อทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุมการไหล ในทั้งสองกรณีเมื่อไหลกลางเริ่มต้นล่างของเมมเบรนจะกลายเป็นข้อ จำกัด ที่มีการก่อกวนลดลงมาจากศูนย์เท่าที่เห็นในรูปที่ 4B เรียบรูปร่างนูนของเมมเบรนที่มีความสำคัญมากเพราะจะช่วยให้สื่อที่จะไหลสม่ำเสมอบนพื้นผิวของเซลล์ที่แนบมาและในรูปแบบหยดที่ตกอยู่เฉพาะจากจุดเดียวที่เป็นศูนย์กลางของเมมเบรน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แสดงขั้นตอนทั้งหมดของ 0.5 ถึง 1.0 × 1010 BAC - โตเทเรียใน 100 – 200 ml น้อยที่สุดไว้กลางใน - tered ช้าๆ ( 1 – 2 นาที ) ภายใต้สูญญากาศบนแผ่นกรองที่เหมาะสมอุณหภูมิในห้องอุ่นๆ หรือโต๊ะตู้สะดวกด้านบน ( รูปที่ 4 ) ผู้ถือกรองทั้งหมดแล้วคว่ำตัวเลข ( 4B )อาหารเลี้ยงเชื้อเทลงในด้านบนของรถยึด ( 300 มล. ) และท่อจากอ่างเก็บน้ำขนาดกลางเชื่อมต่อกับก้านของกรวยกับหยุด - ต่อ . ผลิตระบบการปิดผนึกท่อควรจะแนบมากับแคบแก้วหรือหลอดพลาสติกแข็งที่ติดตั้งในรูเบื่อผ่านจุกขนาดเหมาะสม ดังรูปมันเป็นประโยชน์ที่จะมีมากที่สุดของก้านกับกรวยตัด ตามที่ระบุในรูป บรรเทาเทของสื่อและการเชื่อมต่อของหยุด - ต่อ . ปั๊ม peristaltic สามารถใช้ควบคุมอัตราการไหลของสื่อเป็นเครื่องมือ หลังจากการกลับกัน มันควรจะตั้งค่าที่ประมาณ 15 มิลลิลิตร / นาทีไม่กี่นาทีล้างออก อย่างอ่อนต่อเซลล์แล้วเหลือ 2 มล. / นาที หลังจากนั้นหรือถ้าคุณต้องการที่จะดำเนินการทดสอบก่อนการปั๊มอ่างเก็บน้ำด้านล่างขวดกับเต้าเสียบสามารถวางไว้ด้านบนเครื่องกับท่อ Clamp แสดงการไหลควบคุม ในทั้งสองกรณีเมื่อไหลกลางเริ่มต้นที่ด้านล่างของเยื่อบุจะกลายเป็นคอน - รบกวนด้วยหยดมาจากศูนย์ เท่าที่เห็นในรูป 4B ที่ราบรูปร่างนูนของเมมเบรนมีความสำคัญมากเพราะจะช่วยให้สื่อการไหลอย่างสม่ำเสมอบนพื้นผิวของเซลล์ที่แนบมา และรูปหยดที่ตกลงมา โดยเฉพาะจากจุดเดียวที่ศูนย์ของเยื่อแผ่น