2. Methods and results 2.1 Beads fu

2. Methods and results
2.1 Beads functionalization and bacteria concentration
Paramagnetic beads with 750 nm diameter(Chemicell, ScreenMAG-Amine) were covalently functionalized with phage T4 (ATCC 11303-B4) by the carbodiimide method and as specified in the manufacturer coupling procedure. The phage:bead ratio was first defined via a theoretical calculation based on bead surface, phage dimension and directional phage capsid immobilization. The experimental phages:bead ratios were 84, 112 and 336.
The beads functionalization was characterized in Raman Spectroscopy (Figure 1). The functionalization was proven by similar absorption spectra that were recorded for a single functionalized bead and mean spectra obtained from various functionalized beads. In contrast, bare beads did not show any absorption bands.
E. coli (ATCC 11303) capture experiments were performed at volumes of 0.250, 0.500 and 1 mL. 10 µL of functionalized beads at various concentrations were added to 10 CFU and left to react on a rotating mixer for 15 minutes, followed by magnetic separation. To allow bacteria quantification, the phages were deactivated via UV treatment [7l. Beads-bacteria complex were counted on tryptic soy agar plate (Figure 2). Good capture was obtained in low volumes (250 and 500 µL) with high phage:beads ratrio (112 and 336 phage:bead) and with high beads number(10 and 10). In 1 mL sample the capture was ineffective (data not shown), where only the 336 phage:bead ratio proved a minimal bacteria capture. Therefore the 336 phage:bead ratio will be used in fuethet experiments. The functionalized beads:bacteria stoichiometric relation will require further optimization

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วิธีการและผล
2.1 ลูกปัด functionalization
และแบคทีเรียเข้มข้นลูกปัดparamagnetic ที่มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 750 นาโนเมตร (Chemicell, ScreenMAG-Amine) เป็นฟังก์ชันโควาเลนต์กับ T4 ฟาจ (ATCC 11303-B4) โดยวิธีการ carbodiimide และตามที่ระบุไว้ในขั้นตอนการมีเพศสัมพันธ์ของผู้ผลิต phage อัตราส่วนลูกปัดถูกกำหนดแรกที่ผ่านการคำนวณตามทฤษฎีบนพื้นผิวลูกปัด, มิติทำลายจุลินทรีย์และทิศทางการตรึง capsid ทำลายจุลินทรีย์ phages ทดลอง: อัตราส่วนลูกปัดเป็น 84, 112 และ 336
functionalization ลูกปัดก็มีลักษณะในสเปกรามัน (รูปที่ 1) functionalization ได้รับการพิสูจน์โดยสเปกตรัมการดูดซึมที่คล้ายกันซึ่งถูกบันทึกไว้สำหรับลูกปัดฟังก์ชันเดียวและสเปกตรัมเฉลี่ยที่ได้รับจากลูกปัดฟังก์ชันต่างๆ ในทางตรงกันข้าม, ลูกปัดเปลือยไม่แสดงแถบการดูดกลืนใด ๆ .
อี coli (ATCC 11303) จับทดลองดำเนินการในปริมาณ 0.250, 0.500 และ 1 มิลลิลิตร 10 ไมโครลิตรลูกปัดฟังก์ชันที่ระดับความเข้มข้นต่างๆถูกเพิ่มถึง 10 CFU และซ้ายที่จะตอบสนองในการหมุนผสมเป็นเวลา 15 นาทีตามด้วยการแยกแม่เหล็ก หากต้องการให้มีปริมาณแบคทีเรีย, phages ถูกปิดการใช้งานผ่านการรักษา UV [7L ลูกปัดแบคทีเรียที่ซับซ้อนนับบนแผ่นถั่วเหลือง tryptic วุ้น (รูปที่ 2) การจับภาพที่ดีที่ได้รับในปริมาณต่ำ (250 และ 500 ไมโครลิตร) ที่มีการทำลายจุลินทรีย์สูงลูกปัด ratrio (112 และ 336 phage: ลูกปัด) และมีจำนวนเม็ดสูง (10 และ 10) ในตัวอย่าง 1 มิลลิลิตรจับก็ไม่ได้ผล (ไม่ได้แสดงข้อมูล) ซึ่งเพียง 336 phage อัตราส่วนลูกปัดพิสูจน์จับแบคทีเรียน้อยที่สุด ดังนั้น 336 phage อัตราส่วนลูกปัดจะถูกใช้ในการทดลอง fuethet ลูกปัดฟังก์ชัน: แบคทีเรียที่มีความสัมพันธ์ทางทฤษฎีจะต้องมีการเพิ่มประสิทธิภาพต่อไป

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วิธีการและผลลัพธ์
2.1 ลูกปัด functionalization และแบคทีเรียความเข้มข้น
พาราแมกเนติกลูกปัดที่มีขนาดเส้นผ่านศูนย์กลาง ( chemicell screenmag 750 นาโนเมตร , เอมีน ) covalently ที่มีกับฟา T4 ( ATCC 11303-b4 ) โดย carbodiimide วิธีตามที่ระบุในผู้ผลิตแบบขั้นตอน ว่าอัตราส่วนลูกปัดเป็นครั้งแรกที่กำหนดผ่านการคำนวณทางทฤษฎีตามพื้นผิวลูกปัดมิติและทิศทางฟาฟาเปลือกผล . โดยฟาจทดลอง : อัตราส่วนลูกปัดจำนวน 84 , 112 และ 336 .
ลูกปัด functionalization มีลักษณะในรามันสเปกโทรสโกปี ( รูปที่ 1 ) การ functionalization ถูกพิสูจน์โดยการดูดกลืนรังสีที่คล้ายกันถูกบันทึกไว้เป็นลูกปัดที่มีค่าเฉลี่ยจะมีค่าเดียวจากลูกปัดที่มีหมู่ฟังก์ชันต่าง ๆ ในทางตรงกันข้ามเปลือยลูกปัดไม่แสดงแถบการดูดกลืน .
( E . coli ATCC 11303 ) จับทดลองในปริมาณ 1 มิลลิลิตรและ 0.500 0.250 , 10 µลิตรที่มีลูกปัดที่ความเข้มข้นต่าง ๆ เพิ่ม 10 cfu และซ้ายเพื่อตอบสนองต่อการหมุนเครื่องผสม 15 นาที ตามด้วยการแยกแม่เหล็ก เพื่อให้ปริมาณแบคทีเรียที่ถูกทำลายโดยการจ 7l [ UVลูกปัดแบคทีเรียที่ซับซ้อนนับบนจานอาหารวุ้นถั่วเหลือง ( รูปที่ 2 ) ดีที่จับได้ในปริมาณต่ำ ( 250 และ 500 µลิตร ) กับฟาสูง : ลูกปัด ratrio ( 112 และ 336 ฟา : ลูกปัดด้วยลูกปัด ( สูง ) และหมายเลข 10 และ 10 ) ตัวอย่างภาพใน 1 ml ก็ไม่ได้ผล ( ข้อมูลไม่แสดง ) ซึ่งมีเพียง 336 เฟจต่อลูกปัดพิสูจน์จับแบคทีเรียที่น้อยที่สุด เพราะฉะนั้นท่านว่า :อัตราส่วน fuethet ลูกปัดจะถูกใช้ในการทดลอง ผู้ที่มีลูกปัด : แบคทีเรียอัตราส่วนความสัมพันธ์จะต้องเพิ่มประสิทธิภาพต่อไป