For the separation reported in Fig. 2D, the peak capacity was
equal to 35. To increase peak capacity, longer columns packed with
small particles have been tested with extended gradient time.However,
to avoid changes in selectivity, the basic rules for method
transfer in gradient mode, which have been presented elsewhere
[38], have been strictly applied. In Fig. 3B, a 100mm×2.1mm,
1.7m column was used at a flow rate of 0.5 mL/min. As the column
length varied, the gradient time was scaled accordingly (3.46
vs. 7.05 min) while the initial and final composition remained identical.
In Fig. 3B, the quality of the separation was significantly
improved and peak capacity was 2-fold higher (70). Finally, the column
length was further increased to 150mmand the gradient time
extended to the maximal acceptable value (30 min). The obtained
chromatogram is presented in Fig. 3C. Under these conditions, the
value of P was further increased to 85 in 20 min. Therefore, the gain
in peak capacity between Fig. 3C and B, which was equal to 20%,
was quite limited in proportion to the increase in analysis time
(4-fold) and to the generated backpressure. This observation is in
good agreement with recent UHPLC studies [39–41] that show the
longest column does not necessarily provide an important increase
in gradient performance as the latter depends on both isocratic efficiency
and the column dead time, which is elevated with longer
columns operating at low flow rate.
Eqs. (2) and (3) show the interdependency of peak capacity with
isocratic efficiency (N) and column dead time (t0) [42,43]:
สำหรับแยกรายงานใน Fig. 2D กำลังการผลิตสูงสุดถูก
เท่ากับ 35 เพื่อเพิ่มกำลังการผลิตสูงสุด คอลัมน์ยาวเต็มไปด้วย
อนุภาคขนาดเล็กได้รับการทดสอบ ด้วยเวลาเพิ่มเติมไล่ระดับสีอย่างไรก็ตาม,
เพื่อหลีกเลี่ยงการเปลี่ยนแปลงในวิธี กฎพื้นฐานสำหรับวิธี
โอนในโหมดการไล่ระดับสี ซึ่งมีการแสดงอื่น ๆ
[38], การใช้อย่างเคร่งครัด ใน Fig. 3B, 100 mm × 2. มม. 1,
1ใช้คอลัมน์ 7 เมตรที่อัตราการไหล 0.5 mL/นาที เป็นคอลัมน์
ยาวหลากหลาย การไล่ระดับสีมีปรับเวลาตาม (3.46
เทียบกับ 7.05 นาที) ในขณะที่องค์ประกอบเริ่มต้น และสุดท้ายยังคงเหมือน
3B ใน Fig. คุณภาพของแยกถูกมาก
ดีขึ้น และกำลังการผลิตสูงสุดสูงกว่า 2-fold (70) คอลัมน์สุดท้าย
ยาวเพิ่มเติมขึ้นไป 150mmand เวลาไล่ระดับ
เพิ่มค่าการยอมรับสูงสุด (30 นาที) การได้รับ
chromatogram จะแสดง Fig. 3C. ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้
ค่าของ P เพิ่มขึ้นอีก 85 ใน 20 นาที ดังนั้น กำไร
ในความจุสูงสุดระหว่าง Fig. 3C และ B ซึ่งเป็นเท่ากับ 20%,
มีค่อนข้างจำกัดสัดเพิ่ม ในการวิ time
(4-fold) และ backpressure สร้างขึ้น การสังเกตนี้เป็น
ข้อตกลงที่ดีกับล่า UHPLC ศึกษา [39–41]
คอลัมน์ไม่จำเป็นต้องให้เพิ่มความสำคัญ
ประสิทธิภาพไล่ระดับเป็นหลังขึ้นอยู่กับทั้งประสิทธิภาพ isocratic คิด
และคอลัมน์เวลาตาย ที่ยกระดับด้วยอีกต่อไป
คอลัมน์ทำงานที่อัตราการไหลต่ำ
Eqs (2) และ (3) แสดงความเชื่อมโยงกันของกำลังการผลิตสูงสุดด้วย
isocratic คิดประสิทธิภาพ (N) และคอลัมน์เวลาตาย (t0) [42,43]:
การแปล กรุณารอสักครู่..