2. Experimental2.1. Chemicals and r

2. Experimental
2.1. Chemicals and reagents
The standard catechin flavonoids (+)-catechin (99%, C),
(−)-epicatechin (96%, EC), (−)-catechin gallate (100%, CG),
(−)-epicatechin gallate (99.1%, ECG), (−)-gallocatechin gallate
(99.9%, GCG), (−)-epigallocatechin gallate (95.1%, EGCG), (−)-
epigallocatechin (98.2%, EGC) and also gallic acid (99%, AC) were
all obtained from Sigma–Aldrich (Milan, Italy) and stored at −20 ◦C
in darkness. A stock solution of these eight compounds at a concentration
of 0.5mg/mL was initially prepared in pure methanol,
and working standard solutions were obtained by appropriate
dilution with pure water. Chemical structures of the eight investigated
catechins are reported in Fig. 1. Additional chemicals
such as ether (99%), ethyl acetate (99.5%) and butanol (98%) used
for the liquid–liquid extraction procedures were purchased from
Sigma–Fluka (Buchs, Switzerland).
For the UHPLC–UV experiments, acetonitrile was of HPLC gradient
grade from Panreac Quimica (Barcelona, Spain), and formic acid
was obtained from SDS (Peypin, France). For the UHPLC–MS/MS
experiments, formic acid and acetonitrile (ACN) were of ULC/MS
grade and purchased from Biosolve (Valkenswaard, Netherlands).
Finally, water was obtained from a Milli-Q Water Purification System
from Millipore (Bedford, MA, USA).
2.2. Preparation of tea extract
Lipton brand black “tea time finest Ceylan” tea packaged in tea
bags (2 g of tea per bag) was purchased at a local grocery store.
2.2.1. Preparation of a conventional tea infusion
A brew of black tea was prepared following the instructions provided
on the package by pouring 200mLof boiling water into a glass
flask and dipping a 2 g tea bag for 5min. After cooling to ambient
temperature, the solution was filtered through a nylon filter
(0.45m×47mmfrom Millipore). The tea extract was kept frozen
at 4 ◦C until the analysis. Then, this sample was directly injected
into the UHPLC–UV system and subjected to a 10-fold dilution with
pure water before the UHPLC–MS analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2 ทดลอง
2.1 สารเคมีและสารเคมี
flavonoids มาตรฐานเดน () เดน (99% ค)
(-)-epicatechin (96% อีซี) - gallate-catechin ที่ (100%, CG)
() (-) - epicatechin gallate (99.1%, ECG), (-)-gallocatechin gallate
(99.9% GCG), (-)-epigallocatechin gallate (95.1% EGCG), (-) -
epigallocatechin (98.2%, EGC) และยัง ฝรั่งเศสกรด (99%, AC) ได้
ที่ได้รับทั้งหมดจาก Sigma-Aldrich (มิลาน,อิตาลี) และเก็บไว้ที่ -20 ◦ c
ในความมืด การแก้ปัญหาของหุ้นเหล่านี้แปดสารประกอบที่มีความเข้มข้นของ
0.5mg/ml เตรียมครั้งแรกในเมทานอลบริสุทธิ์
และการทำงานการแก้ปัญหามาตรฐานที่ได้จากการลดสัดส่วนที่เหมาะสม
ด้วยน้ำบริสุทธิ์ โครงสร้างทางเคมีของ catechins สอบสวน
แปดจะมีการรายงานในภาพ 1 สารเคมีเพิ่มเติม
เช่นอีเทอร์ (99%) เอทิลอะซิเตท (995%) และบิวทานอ (98%) ใช้
สำหรับขั้นตอนการสกัดของเหลวของเหลวที่ซื้อมาจากซิก
-หนู (Buchs, วิตเซอร์แลนด์).
สำหรับการทดลอง uhplc-ยูวี, acetonitrile เป็น hplc ลาด
เกรดจาก panreac quimica ( , สเปน) และกรดฟอร์มิ
ได้จาก sds (Peypin, ฝรั่งเศส) เพื่อ uhplc-ms/ms
ทดลองกรดและ acetonitrile (ACN) เป็นของ ULC / มิลลิ
เกรดและซื้อจาก biosolve (Valkenswaard, เนเธอร์แลนด์).
ในที่สุดน้ำที่ได้รับจากพัน q ระบบน้ำบริสุทธิ์
จากค (ฟอร์ด, ma, usa).
2.2 การเตรียมสารสกัดจากชาลิปตันแบรนด์
ดำ "เวลาน้ำชาที่ดีที่สุด Ceylan" ชาบรรจุในถุงชา
(2 กรัมของชาต่อถุง) ถูกซื้อที่ร้านขายของชำในท้องถิ่น.
2.2.1 การเตรียมความพร้อมของชาแช่ธรรมดา
ชงของชาดำได้รับการจัดทำขึ้นตามคำแนะนำที่ให้ไว้ในแพคเกจ
โดย 200mlof เทน้ำเดือดลงในแก้ว
ขวดและจุ่มถุงชา 2 กรัม 5min หลังจากระบายความร้อนให้กับบรรยากาศ
อุณหภูมิการแก้ปัญหาถูกกรองผ่านตัวกรองไนลอน
(0.45 ม. ร-47mmfrom ค) สารสกัดจากชาถูกเก็บไว้แช่แข็ง
4 โ - ฆคจนการวิเคราะห์ แล้วตัวอย่างนี้ถูกฉีดโดยตรง
เข้าไปในระบบ uhplc-ยูวีและยัดเยียดให้เจือจาง 10 เท่าด้วย
น้ำบริสุทธิ์ก่อนที่จะวิเคราะห์ uhplc-MS

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. ทดลอง
2.1 สารเคมีและ reagents
() flavonoids สารสกัดจากมาตรฐาน-สารสกัดจาก (99%, C),
(−) - epicatechin (96%, EC), (−) - สารสกัดจาก gallate (100%, CG,
(−) - epicatechin gallate (99.1%, ECG), (−) - gallocatechin gallate
(99.9%, GCG), (−) - epigallocatechin gallate (95.1%, EGCG), (−) -
epigallocatechin (98.2%, EGC) และยัง มีกรด gallic (99%, AC)
ทั้งหมดที่ได้รับจาก Sigma–Aldrich (มิลาน อิตาลี) และเก็บไว้ที่ −20 ◦C
ในที่มืด ปัญหาหุ้นของสารประกอบเหล่านี้แปดที่เข้มข้น
0.5 mg/mL ได้เริ่มเตรียมในเมทานอลบริสุทธิ์,
และโซลูชั่นมาตรฐานทำงานได้รับ โดยสม
เจือจางกับน้ำบริสุทธิ์ โครงสร้างทางเคมีของแปดสอบสวน
catechins รายงานใน Fig. 1 เคมีเพิ่มเติม
เช่นอีเทอร์ (99%), เอทิล acetate (995%) และบิวทานอ (98%) ใช้
การสกัด liquid–liquid ซื้อขั้นตอนจาก
Sigma–Fluka (Buchs สวิตเซอร์แลนด์) .
experiments สำหรับ UHPLC–UV, acetonitrile มีการไล่ระดับสี HPLC
เกรด Panreac Quimica (บาร์เซโลนา สเปน), และกรด
กล่าวจาก SDS (Peypin ฝรั่งเศส) สำหรับ UHPLC–MS/MS
ทดลอง กรด และ acetonitrile (ACN) ได้ของ ULC/MS
ชั้นปี และซื้อจาก Biosolve (Valkenswaard เนเธอร์แลนด์) .
สุดท้าย น้ำได้รับจากระบบฟอกน้ำ Q
จากมาก (กลาสโกว์ MA, USA) .
2.2 เตรียมชาแยก
Lipton สีดำแบรนด์ "ชาเวลาเซย์แลนดี" ชาบรรจุชา
ถุง (2 กรัมชาต่อถุง) ถูกซื้อที่มีเฉพาะร้านค้า.
2.2.1 เตรียมของคอนกรีตปกติชา
Brew ของชาดำเตรียมไว้ตามคำแนะนำ
บนบรรจุภัณฑ์โดย 200mLof เทน้ำเดือดลงในแก้ว
หนาวและจุ่มถุงชา 2 กรัมสำหรับ 5 นาที หลังจากทำความเย็นไปล้อม
อุณหภูมิ โซลูชั่นที่ถูกกรองผ่านตัวกรองไนล่อน
(0.45 m × 47mmfrom มาก) สารสกัดใบชาถูกเก็บแช่แข็ง
ที่ 4 ◦C จนการวิเคราะห์ จากนั้น อย่างนี้ตรงที่ฉีด
เข้าสู่ระบบ UHPLC–UV และการเจือจาง 10-fold ด้วย
น้ำบริสุทธิ์ก่อนวิเคราะห์ UHPLC–MS