where tgrad is the gradient time,˚

where tgrad is the gradient time,˚is the change in solvent composition
during the gradient, ranging from 0 to 1, and S is a parameter
(slope of the logarithmic plot: d(log k)/d˚) related to the solute
nature, molecular weight and organic modifier nature.
In conclusion, the separation presented in Fig. 3B represents the
best compromise between throughput and resolving power for the
separation of the seven-catechin derivatives and gallic acid.
3.1.3. Application to commercial tea extract
When dealing with standard polyphenols, the UHPLC–UV
method provides excellent selectivity and resolution as demonstrated
above. This proposed strategy was thus applied to the
determination of catechin derivatives in real tea samples.
To illustrate the complexity of the matrix, a real tea sample
infused for 5min was injected into the UHPLC–UV system using
the methods described in Figs. 2D, 3B and C, which correspond to
analysis times of 2, 7 and 24 min, respectively. The corresponding
profiles are presented in Fig. 4 (bold chromatograms) with a
simultaneous overlay of the separations of the eight standard catechins
(light chromatograms). It appears from these figures that tea
extracts are very complex matrices, and, as expected, the different
proposed methods do not present enough resolving power to easily
discriminate catechins contained in tea samples.
Despite these critical separations, it is possible to draw some
qualitative conclusions regarding the content of catechins in our
commercial tea sample. Firstly, it is possible to assess that there
was an important amount of EGCG (peak 8 at 1.23 min in Fig. 4A)
and ECG (peak 5 at 1.66 min in Fig. 4A) in the tea extract as the
corresponding peaks in the three chromatograms were quite significant.
It is a bit more difficult to make the same conclusion on
the presence of EC (peak 2 at 0.92 min in Fig. 4A) and EGC (peak 6 at
0.62 min in Fig. 4A) because quantities were lower. The small peaks
were observed identically on the three chromatograms and confirmed
by standard injection. These results are in good agreement
with a previous study [2], which demonstrated that EGC, EGCG, EC
and ECG were the predominant catechins in tea samples. Regarding
AC (peak 3 at 0.39 min in Fig. 4A), its presence in large quantity was
confirmed by the three chromatograms of Fig. 4, and this is logical
as it is a degradation product of catechin derivatives. Finally,
regarding C (peak at 0.78 min in Fig. 4A), GCG (peak at 1.42 min in
Fig. 4A) and CG (peak at 1.89 min in Fig. 4A), there is no consensus
between results provided by the three profiles presented in Fig. 4.
Indeed, there is no evidence for these three compounds in Fig. 4A
and C while there were some important peaks for these three catechins
in the chromatogram of Fig. 4B. This clearly demonstrates
the limitations of the UHPLC–UV strategy for the qualitative evaluation
of catechins and the difficulty of carrying out the quantitative
evaluation of complex tea extracts.
To avoid these problems, two strategies were investigated: (i)
addition of a selective sample preparation, namely LLE prior to the
UHPLC–UV separation (discussed in Section 3.2) and (ii) switching
from the universal UV to the selective MS detector (discussed in
Section 3.3).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ที่ tgrad เป็นเวลาที่ลาด, หคือการเปลี่ยนแปลงในตัวทำละลายองค์ประกอบ
ในระหว่างการไล่ระดับตั้งแต่ 0-1 และคือพารามิเตอร์
(ความลาดเอียงของพล็อตลอการิทึม ๆ : d (log k) / วันห) ที่เกี่ยวข้องกับ ตัวถูกละลาย
ธรรมชาติน้ำหนักโมเลกุลและธรรมชาติปรับปรุงอินทรีย์.
ในการสรุปการแยกที่นำเสนอในมะเดื่อ 3b แสดงให้เห็นถึงการประนีประนอม
ที่ดีที่สุดระหว่างการส่งผ่านและอำนาจในการแก้ไข
การแยกของสัญญาซื้อขายล่วงหน้าเจ็ดเดนและฝรั่งเศสกรด.
3.1.3 การประยุกต์ใช้สารสกัดชาเชิงพาณิชย์
เมื่อจัดการกับโพลีฟีนมาตรฐาน uhplc-ยูวี
วิธีการให้เลือกที่ยอดเยี่ยมและแสดงให้เห็นถึงความละเอียด
ข้างต้น กลยุทธ์ที่นำเสนอนี้จึงถูกนำมาใช้ในการตัดสินใจของ
อนุพันธ์เดนในตัวอย่างชาจริง.
ที่จะแสดงให้เห็นถึงความซับซ้อนของเมทริกซ์ที่ตัวอย่างชาจริง
สีเพื่อ 5min ถูกฉีดเข้าไปในระบบ uhplc-ยูวีใช้
วิธีการที่อธิบายในมะเดื่อ 2d, 3b และคซึ่งสอดคล้องกับการวิเคราะห์
ช่วงเวลาของ 2, 7 และ 24 นาทีตามลำดับ
โปรไฟล์นั้นจะถูกนำเสนอในมะเดื่อ 4 (chromatograms ตัวหนา) ด้วย
แสดงข้อมูลพร้อมกันของการแยกในแปด catechins มาตรฐาน
(chromatograms แสง)มันจะปรากฏขึ้นจากตัวเลขเหล่านี้ที่ชา
สารสกัดจากการฝึกอบรมมีความซับซ้อนมากและคาดว่าจะเป็นวิธีการที่แตกต่างกันเสนอ
ทำไม่ได้อยู่พอแก้ไขอำนาจเพื่อให้ง่ายต่อการแยกแยะ
catechins ที่มีอยู่ในตัวอย่างชา.
แม้จะมีการแยกที่สำคัญเหล่านี้ก็เป็นไปได้ที่จะ วาดบาง
ข้อสรุปเชิงคุณภาพเกี่ยวกับเนื้อหาของ catechins ใน
ตัวอย่างชาเชิงพาณิชย์ของเรา ประการแรกมันเป็นไปได้ที่จะประเมินว่ามี
เป็นจำนวนเงินที่สำคัญของการ EGCG (สูงสุด 8 ที่ 1.23 นาทีในมะเดื่อ. 4a)
และคลื่นไฟฟ้าหัวใจ (สูงสุด 5 ที่ 1.66 นาทีในมะเดื่อ. 4a) ในสารสกัดชาเป็น
ยอดเขาที่สอดคล้องกันใน สาม chromatograms อย่างมีนัยสำคัญค่อนข้าง.
มันเป็นบิตยากมากขึ้นเพื่อให้ข้อสรุปที่เหมือนกันในการแสดงตนของ
EC (สูงสุด 2 ที่ 0.92 นาทีในมะเดื่อ. 4a) และ EGC (สูงสุด 6 ที่
0.62 นาทีในมะเดื่อ4a) เพราะปริมาณต่ำ ยอดเขาเล็ก ๆ
พบกันที่สาม chromatograms และยืนยัน
โดยการฉีดมาตรฐาน ผลลัพธ์เหล่านี้อยู่ในข้อตกลงที่ดี
กับการศึกษาก่อนหน้า [2] ซึ่งแสดงให้เห็นว่า EGC, EGCG, EC
และคลื่นไฟฟ้าหัวใจเป็น catechins เด่นในตัวอย่างชา เกี่ยวกับ
แด (สูงสุด 3 ที่ 0.39 นาทีในมะเดื่อ 4a.), แสดงตนในปริมาณมากเป็น
ได้รับการยืนยันโดยสาม chromatograms ของมะเดื่อ 4 และนี่คือตรรกะ
เป็นผลิตภัณฑ์ที่ย่อยสลายของสัญญาซื้อขายล่วงหน้าเดน ที่สุด
เกี่ยวกับค (ยอดที่ 0.78 นาทีในมะเดื่อ. 4a) GCG (ยอดที่ 1.42 นาทีใน
4a มะเดื่อ.) และบรรษัทภิบาล (ยอดที่ 1.89 นาทีในมะเดื่อ. 4a) มีมติไม่
ระหว่างผลที่ได้รับจาก สามรูปแบบที่นำเสนอในมะเดื่อ 4.
จริงมีหลักฐานทั้งสามสารประกอบในภาพไม่มี 4a
c และในขณะที่มีบางสิ่งที่สำคัญสำหรับยอดเขาทั้งสาม catechins
ในโครมาโทของมะเดื่อ 4b นี้แสดงให้เห็นอย่างชัดเจน
ข้อ จำกัด ของกลยุทธ์ uhplc-ยูวีสำหรับการประเมินคุณภาพของ
catechins และความยากลำบากในการดำเนินการประเมินผลเชิงปริมาณของสารสกัด
ชาซับซ้อน.
เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาเหล​​่านี้สองกลยุทธ์การตรวจสอบ (i)
นอกจากนี้ในการจัดทำตัวอย่างการคัดเลือกคือ lle ก่อนที่จะมีการแยก uhplc
-ยูวี (กล่าวถึงในส่วน 3.2) และ (ii) การเปลี่ยน
จากยูวีสากลเพื่อตรวจจับการคัดเลือกมิลลิวินาที (ที่กล่าวไว้ใน ส่วน
3.3)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เวลาไล่โทนสี ˚is การเปลี่ยนแปลงในองค์ประกอบของตัวทำละลาย tgrad
ระหว่างไล่ระดับสี ตั้งแต่ 0 ถึง 1 และ S คือ พารามิเตอร์
(ชันลอการิทึมแผน: d(log k)/d˚) ที่เกี่ยวข้องกับตัวถูกละลาย
ธรรมชาติ น้ำหนักโมเลกุล แล้วปรับอินทรีย์ธรรมชาติ
เบียดเบียน แยกใน Fig. 3B แทน
ประนีประนอมระหว่างอัตราความเร็วและพลังงานสำหรับการแก้ไขที่ดีที่สุด
แยกของอนุพันธ์สารสกัดจากเซเว่นและกรด gallic.
เป็น 3.1.3 แยกการค้าชา
เมื่อจัดการกับโพลีฟีนมาตรฐาน UHPLC–UV
วิธีมีวิธีที่ดีและละเอียดดัง
ข้างบน จึงได้ใช้กลยุทธ์นี้เสนอ
กำหนดอนุพันธ์สารสกัดจากในตัวอย่างชาจริง.
เพื่อแสดงให้เห็นถึงความซับซ้อนของเมตริกซ์ ตัวอย่างชาจริง
ลงตัวสำหรับ 5 นาทีถูกฉีดเข้าไปในการใช้ระบบ UHPLC–UV
วิธีอธิบายไว้ใน Figs. 2D, 3B และ C ซึ่งสอดคล้องกับ
วิเคราะห์เวลานาทีที่ 2, 7 และ 24 ตามลำดับ ให้สอดคล้องกับ
โพรไฟล์จะนำเสนอใน Fig. 4 (หนา chromatograms) เป็น
เกิดการซ้อนทับของประโยชน์ของ
(light chromatograms) catechins 8 มาตรฐาน ปรากฏจากรูปเหล่านี้ที่ชา
สารสกัดเป็นเมทริกซ์ซับซ้อนมาก และ ตาม คาด ต่าง ๆ
เสนอวิธีไม่แสดงอำนาจพอ resolving ง่าย ๆ
เหยียด catechins ในชาตัวอย่างการ
แม้ประโยชน์สำคัญเหล่านี้ เป็นการวาดบาง
บทสรุปเชิงคุณภาพเกี่ยวกับเนื้อหาของ catechins ในเรา
อย่างชาพาณิชย์ ประการแรก เป็นการประเมินที่มี
ถูกจำนวน EGCG (สูง 8 ที่ 1.23 นาทีใน Fig. 4A) ที่สำคัญ
และ ECG (สูง 5 ที่ 1.66 นาทีใน Fig. 4A) ในชาแยกเป็น
ยอดตรงกันใน chromatograms สามได้ค่อนข้างสำคัญ.
มันเป็นบิตมากขึ้นยากที่จะทำให้ข้อสรุปเดียวกันบน
ของ EC (ค 2 ที่ 0.92 min ใน Fig. 4A) และ EGC (peak 6 ที่
0.62 min ในฟิก 4A) เนื่องจากปริมาณต่ำกว่า แห่งขนาดเล็ก
สังเกตตรงบน chromatograms สาม และยืนยัน
โดยฉีดมาตรฐาน ผลลัพธ์เหล่านี้อยู่ในข้อตกลงที่ดี
ด้วยก่อนหน้านี้ศึกษา [2], ซึ่งแสดงว่า EC EGC, EGCG
และ ECG catechins กันในตัวอย่างชา เกี่ยวกับ
AC (ค 3 ที่ 0.39 นาทีใน Fig. 4A), สถานะของตนในปริมาณมากถูก
ยืนยัน โดย chromatograms 3 Fig. 4 และนี้คือตรรกะ
มันเป็นอนุพันธ์สารสกัดจากผลิตภัณฑ์ย่อยสลาย สุดท้าย,
เกี่ยวกับ C (ช่วงที่ 0.78 min ใน Fig. 4A), GCG (ช่วงที่ 1.42 นาทีใน
Fig. 4A) และ CG (ช่วงที่ 1.89 min ใน Fig. 4A), มีมติไม่
ระหว่างผลลัพธ์โดยค่า 3 ใน Fig. 4.
Indeed ไม่สำหรับสารเหล่านี้สาม Fig. 4A
และ C ในขณะที่มีบางยอดสำคัญสำหรับ catechins เหล่านี้สาม
ใน chromatogram ของ Fig. 4B นี้แสดงชัดเจน
ข้อจำกัดของกลยุทธ์ UHPLC–UV สำหรับการประเมินเชิงคุณภาพ
catechins และความยากของการดำเนินการเชิงปริมาณ
ประเมินผลของสารสกัดจากชาซับซ้อน.
เพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาเหล่านี้ กลยุทธ์ที่สองถูกสอบสวน: (i)
แห่งการเตรียมตัวอย่างงาน LLE คือก่อน
แยก UHPLC–UV (กล่าวถึงในหัวข้อ 3.2) และ (ii) สลับ
จาก UV สากลเพื่อจับ MS ใช้ (ใน
3.3 ส่วน)