Compound preparationDried ethanol e

Compound preparation
Dried ethanol extract and 5,7, 4-trimethoxyflavone(KP.8.10), of K. parviflora were prepared at the Center
for Research and Development of Herbal Health
Promotion, Faculty of Pharmaceutical Science, Khon
Kaen University. They were dissolved in
dimethylsulphoxide (DMSO; Sigma) to make stock
solutions (100 mg/ml, and 10 mg/ml), filtered, and stored
at –20°C. For working solutions, they were further diluted
with HamF-12 media to the desired concentrations. For
each preparation, the final concentration of DMSO was
limited at 0.2% minimum.
Cell viability assays
HuCCA-1 and RMCCA-1 cells were grown to
monolayer and maintained in HamF-12 medium
(Hyclone) supplemented with 10% heat-inactivated fetal
bovine serum (FBS) (Hyclone), 100 U/ml penicillin and
100 μg/ml streptomycin. The cells (1.0x105cells/ml) were
plated in 96-well plates in 100 μl of completed medium
and cultured overnight in 37oC, 5% CO2 incubator. Cells
were treated with various concentrations of crude ethanol
extract or KP.8.10 compound and further incubated for
48h. Cell viability was determined by MTT assay using
In Vitro Toxicity Assay Kit MTT based (Sigma).
Percentage of cell survival was calculated and the CC50
was determined.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เตรียมผสมสารสกัดเอทานอลที่แห้งและ 5,7, 4-trimethoxyflavone(KP.8.10) ของคุณกระชายดำได้เตรียมไว้ที่ศูนย์วิจัยและพัฒนาสมุนไพรสุขภาพโปรโมชั่น คณะเภสัชศาสตร์ ขอนแก่นมหาวิทยาลัยขอนแก่น พวกที่ละลายในdimethylsulphoxide (DMSO ซิกมา) เพื่อให้สินค้าคงคลังโซลูชั่น (100 mg/ml และ 10 mg/ml), กรอง และจัดเก็บที่ –20 องศาเซลเซียส การทำงานแก้ไขปัญหา พวกเขาได้เพิ่มเติมยกเว้นมีสื่อ HamF 12 ความเข้มข้นที่ต้องการ สำหรับมีความเข้มข้นสุดท้ายของ DMSO เตรียมแต่ละจำกัดที่ 0.2% ต่ำสุดเซลล์ชีวิต assaysHuCCA-1 และ RMCCA-1 เซลล์ที่ปลูกไปmonolayer และรักษาใน HamF-12(Hyclone) เสริม ด้วย 10% ยกเลิกร้อนและทารกในครรภ์วัวซีรั่ม (FBS) (Hyclone), 100 U/ml ยาเพนนิซิลลิน และStreptomycin μg 100 ml มีเซลล์ (1.0x105cells/ml)ชุบในแผ่น 96 ดีใน 100 μl ของกลางเสร็จสมบูรณ์และแอร์พอร์ตโอเวอร์ไนท์อ่างใน 37oC, 5% CO2 incubator เซลล์ได้รับการรักษา มีหลายความเข้มข้นของเอทานอลน้ำมันสารสกัดหรือ KP.8.10 ผสม และ incubated เพิ่มเติมสำหรับh. 48 เซลล์ชีวิตถูกกำหนดโดย MTT assayในหลอด Toxicity Assay Kit MTT ตาม (ซิกมา)มีคำนวณเปอร์เซ็นต์ของความอยู่รอดของเซลล์ และ CC50ที่ถูกกำหนด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเตรียมสารประกอบสารสกัดเอทานอลและแห้ง 5,7, 4 trimethoxyflavone (KP.8.10) ของเคดำได้จัดทำที่ศูนย์เพื่อการวิจัยและพัฒนาสมุนไพรสุขภาพโปรโมชั่น, คณะเภสัชศาสตร์, Khon Kaen University พวกเขาถูกกลืนหายไปในdimethylsulphoxide (DMSO; ซิกม่า) เพื่อให้หุ้นโซลูชั่น(100 mg / ml และ 10 mg / ml) กรองและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ-20 องศาเซลเซียส สำหรับการแก้ปัญหาการทำงานที่พวกเขาได้รับการปรับลดต่อไปกับสื่อ HamF-12 ความเข้มข้นที่ต้องการ สำหรับการเตรียมความพร้อมในแต่ละความเข้มข้นสุดท้ายของ DMSO ถูก จำกัด ที่ 0.2% ต่ำสุด. ตรวจความมีชีวิตเซลล์HuCCA-1 และ RMCCA-1 เซลล์ปลูกเพื่อmonolayer และการบำรุงรักษาในระยะกลาง HamF-12 (Hyclone) เสริมด้วย 10% ความร้อนการใช้งานของทารกในครรภ์วัวซีรั่ม (FBS) (Hyclone) 100 penicillin U / ml และ100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร streptomycin เซลล์ (1.0x105cells / มล.) ได้รับการชุบในแผ่น96 หลุมใน 100 ไมโครลิตรของกลางแล้วเสร็จและค้างคืนที่เลี้ยงใน37oC, 5% CO2 ศูนย์บ่มเพาะ เซลล์ได้รับการรักษาที่มีความเข้มข้นต่างๆของเอทานอลน้ำมันดิบสารสกัดหรือสารKP.8.10 และบ่มต่อไปสำหรับ48 ชั่วโมง มีชีวิตเซลล์ถูกกำหนดโดยการทดสอบ MTT ใช้ในหลอดทดลองความเป็นพิษAssay Kit MTT based (ซิกม่า). ร้อยละของการอยู่รอดของเซลล์ที่คำนวณได้และ CC50 ถูกกำหนด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมสารสกัดเอทานอลและ 5
แห้ง 4-trimethoxyflavone ( KP . 8.10 ) , K . ระดับเตรียมไว้ที่ศูนย์วิจัย และพัฒนา

สมุนไพรส่งเสริมสุขภาพ , คณะเภสัชศาสตร์ , มหาวิทยาลัยขอนแก่น ,
มหาวิทยาลัยขอนแก่น พวกเขาละลาย
dimethylsulphoxide ( DMSO ; ซิกม่า ) เพื่อให้หุ้น
โซลูชั่น ( 100 mg / ml และ 10 mg / ml ) , กรอง , และเก็บไว้ที่ - 20 องศา C .
โซลูชั่นสำหรับการทำงานที่พวกเขาเพิ่มเติมเจือจาง
กับ hamf-12 สื่อต้องการความเข้มข้น สำหรับ
แต่ละการเตรียมความเข้มข้นสุดท้ายของ DMSO เป็น
จำกัดที่ 0.2% ขั้นต่ำ .
)
hucca-1 rmcca-1 viability ของเซลล์และเซลล์ปลูก

อย่าง และรักษาในกลาง hamf-12 ( hyclone ) เสริมด้วย 10% fetal bovine serum inactivated ความร้อน
( FBS ) ( hyclone ) 100 U / ml เพนนิซิลิน และ
100 μ g / ml จัง . เซลล์ ( 1.0x105cells / มิลลิลิตร
ชุบ 96 ดีแผ่น 100 μล. แล้วเสร็จกลาง
และเพาะเลี้ยงค้างคืนใน 37oc , 5% CO2 ตู้ฟักไข่ เซลล์
รักษาด้วยสารสกัดเอทานอลความเข้มข้นต่าง ๆ ของดิบ หรือ kp.8.10 สารประกอบและต่อไป

) สำหรับเลี้ยง เซลล์ถูกกำหนดโดยวิธี MTT assay โดยใช้
ในชุดหลอดจากพิษยา
( ซิกม่า )รอดตายของเซลล์ได้คำนวณและ cc50
ถูกกำหนดไว้