2.6 Detection of Hydroxyl Radicals

2.6 Detection of Hydroxyl Radicals by Deoxyribose Assay
The assay was performed as described by Halliwell et al. [24] and
Stoilova et al. [25]. All solutions were freshly prepared. One ml of
the reaction mixture contained 100 μl of 28 mM 2-deoxy-ribose
(dissolved in KH2PO4–K2HPO4 buffer, pH 7.4), 500 μl solution of
various concentrations of the extract (at final concentration of 15,
30, 60 and 120 μg/ml in the reaction mix), 200 μl of 200 M FeCl3
and 1.04 mM EDTA (1:1 v/v), 100 μl H2O2 (1.0 mM) and 100 μl
ascorbic acid (1.0 mM). After an incubation period of 1 h at 37°C
the extent of deoxyribose degradation was measured by the TBA
reaction. 1.0 ml of TBA (1% in 50 mM NaOH) and 1.0 ml of 2.8%
TCA were added to the reaction mixture and the tubes were heated
at 100 °C for 20 min. After cooling, the absorbance was read at 532
nm against a blank (containing only buffer and deoxy-ribose). The
percentage inhibition (I %) was calculated by the formula:
I% = 100 – (Abs.sample / Abs.control) X 100
The IC50 value represents the concentration of the compounds that
caused 50% inhibition of radical formation. Quercetin was used as
a positive control. The data obtained at each point were the average
of three measurements.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 การตรวจจับของอนุมูลไฮดรอกโดย Deoxyribose Assayทดสอบการดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดย Halliwell et al. [24] และStoilova et al. [25] โซลูชันทั้งหมดที่ปรุงสดใหม่ หนึ่งมิลลิลิตรผสมปฏิกิริยาอยู่ 100 μl ของ 28 มม. 2-deoxy-น้ำตาล(ละลาย KH2PO4 – K2HPO4 บัฟเฟอร์ ค่า pH 7.4), แก้ μl 500ต่าง ๆ ความเข้มข้นของสารสกัดที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ 1530, 60 และ 120 ไมโครกรัม/มล.ผสมปฏิกิริยา), μl 200 200 M FeCl3และ 1.04 mM EDTA (1:1 v/v), 100 μl H2O2 (1.0 mM) และ 100 μlกรดแอสคอร์บิค (1.0 mM) หลังจากบ่มเป็นระยะเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37° Cขอบเขตของการลด deoxyribose โดยวัดจาก TBAปฏิกิริยา 1.0 ml ของ TBA (1% NaOH 50 มม.) และ 2.8% 1.0 มิลลิลิตรTCA ได้เพิ่มส่วนผสมของปฏิกิริยา และท่อถูกทำให้ร้อนที่ 100 ° C 20 นาที หลังจากเย็น absorbance ที่อ่านที่ 532นาโนเมตรกับว่างเปล่า (ประกอบด้วยบัฟเฟอร์และ deoxy-น้ำตาลเท่านั้น) การเปอร์เซ็นต์ยับยั้ง (ฉัน%) โดยใช้สูตรคำนวณ:ผม% = 100- (Abs.sample / Abs.control) X 100ค่า IC50 แทนความเข้มข้นของสารที่เกิด 50% ยับยั้งการก่อตัวของอนุมูลอิสระ ใช้ quercetin เป็นตัวควบคุมที่เป็นค่าบวก ข้อมูลที่แต่ละจุดมีค่าเฉลี่ยวัดสาม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 การตรวจหาอนุมูลไฮดรอกซิโดย Deoxyribose Assay
ผลการวิเคราะห์ที่ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดยฮอล์ลิ et al, [24] และ
Stoilova et al, [25] โซลูชั่นทั้งหมดถูกปรุงสดใหม่ หนึ่งมิลลิลิตร
ผสมปฏิกิริยาที่มีอยู่ 100 ไมโครลิตร 28 มิลลิ 2 Deoxy-น้ำตาล
(ละลายใน KH2PO4-K2HPO4 บัฟเฟอร์ค่า pH 7.4), การแก้ปัญหาไมโครลิตร 500 ของ
ความเข้มข้นต่างๆของสารสกัด (ที่มีความเข้มข้นสุดท้ายของ 15,
30, 60 และ 120 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรในการผสมปฏิกิริยา) 200 ไมโครลิตร 200 M FeCl3
และ 1.04 มิลลิ EDTA (1: 1 v / v) 100 ไมโครลิตร H2O2 (1.0 มิลลิเมตร) 100 ไมโครลิตร
วิตามินซี (1.0 มิลลิเมตร) หลังจากระยะฟักตัวประมาณ 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส
ขอบเขตของการย่อยสลาย Deoxyribose ถูกวัดจาก TBA
ปฏิกิริยา 1.0 มิลลิลิตร TBA (1% ในขนาด 50 มม NaOH) และ 1.0 มล. 2.8%
TCA ถูกเพิ่มเข้าไปผสมปฏิกิริยาและท่อที่ถูกความร้อน
ที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที หลังจากเย็น, การดูดกลืนแสงที่ถูกอ่านได้ที่ 532
นาโนเมตรเทียบกับที่ว่างเปล่า (ที่มีเพียง buffer และ Deoxy-น้ำตาล)
ยับยั้งเปอร์เซ็นต์ (I%) ที่คำนวณได้จากสูตร:
ฉัน% = 100 - (Abs.sample / Abs.control) x 100
ค่า IC50 แสดงให้เห็นถึงความเข้มข้นของสารที่
ก่อให้เกิดการยับยั้ง 50% ของการก่อตัวรุนแรง Quercetin ถูกใช้เป็น
ตัวควบคุมในเชิงบวก ข้อมูลที่ได้ในแต่ละจุดมีค่าเฉลี่ย
ของวัดสาม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 การตรวจหาอนุมูลไฮดรอกซิลโดยการปรับปรุงซอฟต์แวร์ การทดสอบ
( กำลังดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดย Halliwell et al . [ 24 ] และ
stoilova et al . [ 25 ] โซลูชั่นทั้งหมดเตรียมสด ๆ หนึ่งมิลลิลิตร
ปฏิกิริยาของส่วนผสมที่มีอยู่ 100 μ 2-deoxy-ribose 28 มม.
( ละลายใน kh2po4 – k2hpo4 buffer pH 7.4 ) , 500 μผมแก้ปัญหา
สารสกัดที่ความเข้มข้นต่างๆ ( ที่ความเข้มข้นสุดท้าย 15
30 , 60 และ 120 μ g / ml ในปฏิกิริยาผสม ) 200 μ L 200 เมตร FeCl3
1.04 mm และ EDTA ( 1 : 1 v / v ) L 100 μ H2O2 ( มม. ) และ 100 μ l
กรดแอสคอร์บิค ( มม. ) ผ่านระยะฟักตัว 1 H ที่ 37 องศาซี
ขอบเขตของการย่อยสลายดีออกซีไรโบสวัดโดย TBA
ปฏิกิริยา 1.0 มล. TBA ( 1 ใน 50 mm NaOH 1.0 มล. 2.8% ) และ
บริษัทมีการเพิ่มปฏิกิริยาผสมและท่อ คือ อุ่น
ที่ 100 องศา C เป็นเวลา 20 นาที หลังจากเย็น , การดูดกลืนแสงก็อ่านมัน
nm กับว่าง ( ที่มีบัฟเฟอร์เท่านั้น และดีอ ซีหน้าตัวเมีย ) ที่
ค่าร้อยละ ( % ) และคำนวณโดยสูตร :
ฉัน % = 100 ) ( abs.sample / ABS ควบคุม ) x 100
ค่า ic50 แสดงถึงความเข้มข้นของสารประกอบที่
ยับยั้งการเกิดอนุมูลอิสระทำให้ 50% . ใช้เคอร์
ตัวควบคุมบวก ข้อมูลที่ได้ในแต่ละจุดมีเฉลี่ย
สามวัด